DECODON - Deta2D Quickguide - Organizing Gel Images
decodon - exploring life.
-
-
-
-
-
-
-
-
-
- exploring life.
-
-
-
- solutions      
-

--------
--------
Delta2D
Paver
MS Repo
Protecs
Services
--------
Downloads
Documentation
Helpdesk
--------
DECODON
Jobs
Press
--------
Contact
--------
--------
--------



4.34 MB

| English | | Deutsch | | Español |

  

Delta2D 3.6

this document for Delta2D 4.1



管理凝胶图像

我们从硬盘上的原始数据开始。此实验例子中包含一个对照样本,和两个实验样本,分别是应用化学试剂处理后1分钟和10分钟的取样,每次取2个平行样本。

图像文件

样本

control_01.gel

对照(平行1)

control_02.gel

对照(平行2)

1min_01.gel

处理1分钟取样(平行1)

1min_02.gel

处理1分钟取样(平行2)

10min_01.gel

处理10分钟取样(平行1)

10min_02.gel

处理10分钟取样(平行2)

如果您还没有完成此步, 请下载我们在本指南中将使用的样本数据包: http://www.decodon.com/Support/Documentation/Delta2D-samples.zip 并解开压缩。包中含有6张双向凝胶电泳图像和其变形匹配图文件。

Delta2D起步

在Windows系统中顺序点击开始-程序-DECODON-Delta2D来启动软件, 在其它系统中根据对应安装方法决定。随后Delta2D项目管理器出现并请求打开一个已存在的项目。

项目是凝胶图像文件和分析数据,如色斑的边界定量等的集合。现在,可以看到软件中有一个随安装而来的演示项目。

当Delta2D启动后,
对话框会提供一个当前工作池中可选项目的列表,以及选项开关来更改工作池。

建立一个新的数据池

Delta2D保存所有和当前凝胶电泳图像相关的数据,包含图像本身,到硬盘中一个文件夹中。 我们称这个文件夹为一个“池”。它包含多个由Delta2D管理的子文件夹和数据文件。为了能保持所有的实验数据被很好的管理,我们建议为每一个新的实验内容建立一个新池。

  1. 点击'Change Pool'(改变池) 按钮,并浏览转到您要保存新池的文件夹。
  2. 右击鼠标按钮选择'Create Folder'(创建文件夹), 随后点此新建的文件夹并选择它后,按F2键可以给此新池命名,完成后用ENTER键结束输入。
  3. OK后选Yes确认随后的对话框。

为不同的实验选择不同的池路径,从而将他们彼此以及和演示数据分开。进而方便复制,移动,备份不同的池。请尽量避免使用网络驱动器。

创建一个新的项目

'项目'对话框随后再次出现展示一个空的可选项目列表,标题栏为您现在正在工作的池路径。 点击New(新建)按钮创建一个新项目,打开一个对话框输入详细项目资料。可在此提供项目名字和作者并插入一个简断的描述。请不要选择'Use Internal Standard' (使用内标)的选择框。点OK建立一个新项目,然后在项目对话框中选择此新项目并按下Open。无论何时打开一个新建项目,都会自动建立两个新的空组。

Für DIGE-Projekte aktivieren Sie bitte die Checkbox 'Use Internal Standard'.

创建凝胶图像组

推荐使用组来管理凝胶电泳图像。通常,您的项目会为每一个平行实验准备一个组。 我们现在将为我们的实验创建三个组。而已经建好两个了,我们将简单的更改他们的名称。

  1. 右击第一个组并在内容菜单中选择'Group Properties'(组特性)。
  2. 使用 'control' (对照) 来替换组的名称,如果您愿意,可为组选择另外的颜色,然后选择OK来确认。
  3. 重复此步骤,建立第二个组,起名为 '1min'(1分钟)。

在组菜单中选择'New'(新建)来创建一个新组,起名为'10min'(10分钟),可以根据喜好选择一个不同的颜色。您可以在任何时候添加或删除组。

添加凝胶电泳图像到新建项目中

点击组'control'(对照)将图像添加到当前组中。凝胶管理器打开并显示当前池中所有的凝胶。由于这个池为新建为空,我们必须为其导入凝胶图像。点击按钮'Import'(导入), 并切换到刚才解压来自网站的样本数据包的目录。其子目录中含有名为'samples'的样本凝胶图像。用鼠标左键组合Ctrl键选择两个图像'control_01'和'control_02',点击'Next'(下一步)。在这一步中,您可以编辑图像的名字和描述,以及做一些简单的控制操作,如旋转,反映,翻转图像等。再次点击'Next'(下一步),为下一个图像重复此步操作。

其间任何时候如果您想要直接导入图像而不加任何修改,您可以点击'Finish'(结束)。 导入样本图像'1min_01', '1min_02', '10min_01'和'10min_02'到他们各自的组中。现在每一组平行图像已经放置到了不同的组中,项目展示如下:

项目管理器: 三个组中含有六个样本图像(’control', '1min', '10min').
每一个单元格代表不同的图像对。

创建一个DIGE分析项目

分析DIGE和其他复杂试验,首先请按照如上的步骤概要,比如根据样本分组管理凝胶图像。
一个拥有两张凝胶和两个样本(A和B)的简单DIGE实验如下所示。平行实验被分在同一个组中。内标的图像则被分在'standard'(标准)组中。

图像文件

染料

凝胶

样本

g001_cy2.tif

Cy 2

Gel I

Interner Standard, Gel I

Standard

g001_cy3.tif

Cy 3

Gel I

Probe A (Replikat 1)

Probe A

g001_cy5.tif

Cy 5

Gel I

Probe B (Replikat 1)

Probe B

g002_cy2.tif

Cy 2

Gel II

Interner Standard, Gel II

Standard

g002_cy3.tif

Cy 3

Gel II

Probe B (Replikat 2)

Probe B

g002_cy5.tif

Cy 5

Gel II

Probe A (Replikat 2)

Probe A

注:Internal standard (内标);replicate: 平行;Sample 样本

Delta2D可以应用内部标准来定量。也就是说,一个色斑的定量除以同一个凝胶上对应色斑在内标中的定量。因此让Delta2D明确哪些图像属于同种凝胶,而采用哪张内标图像是至关重要的。

  1. 使用内标图像配置当前项目
    在项目管理器中,选择File -> Project properties (文件->项目属性),然后标记选择'Use Internal Standard'的复选框。
  2. 2. 指定凝胶到凝胶图像
    现在我们必须告知Delta2D每个图像来自那张凝胶,以及其对应的内标图像的存放位置。在项目管理器中,选择File -> Gel Image Attributes (文件->获得凝胶图像特性). 选择'Gel'标签,您可以看到一个凝胶的列表(罗马数字风格),以及每张凝胶而来的图像。您可以右键点击图像并指派给一个特定的凝胶。
    另外,您也可以拖拽图像到另一张凝胶上。按照实验的设计来组织安排图像。
  3. 关联确认内标图像
    对于每一张凝胶,您可以看到一列单选按钮。通过选择图像旁边的按钮来选定包含内标的图像(通常为Cy2图像)。
-